Quando si maneggiano i microrganismi, è importante utilizzare correttamente una tecnica asettica, sia per evitare che i microrganismi vengano contaminati da forze esterne, sia per proteggere te stesso e le persone intorno a te.
Passi
Passaggio 1. Proteggiti
Lega i capelli lunghi e indossa un camice da laboratorio e occhiali protettivi.
Passaggio 2. Lavati le mani e il tuo spazio di lavoro
Lavati le mani con acqua e sapone e spruzza sulla panca il 70% di etanolo.
Passaggio 3. Disponi tutta la tua attrezzatura
Assicurati di avere tutto pronto prima di iniziare.
Passaggio 4. Accendi il becco Bunsen il più in alto possibile
Ne avrai bisogno per sterilizzare la tua attrezzatura e il tiraggio verso l'alto impedisce ai contaminanti esterni di atterrare sulla tua coltura.
Ruota il collare in modo che il flusso d'aria sia completamente aperto
Passaggio 5. Sterilizzare l'ansa di inoculazione
Tienilo a un angolo di circa 45° verso il basso e spostalo lentamente attraverso la fiamma in modo che diventi rosso-bianco caldo.
- È più facile tenere l'anello tra il pollice e l'indice e sostenerlo con il dito medio.
- La parte più calda della fiamma si trova proprio sulla punta del cono di fuoco blu interno.
Passaggio 6. Usa l'altra mano per afferrare la tua cultura originale
- Se è un piatto, tienilo in mano e apri il coperchio quanto basta per far entrare l'anello.
- Se si tratta di un tubo con un coperchio, usa il mignolo della mano con cui stai tenendo l'ansa per l'inoculazione per rimuovere il coperchio, quindi trascina rapidamente l'apertura del tubo attraverso la fiamma del becco Bunsen due volte. Questo è chiamato fiammeggiante e uccide tutto ciò che vuole entrare nel tubo e crea una corrente di convezione che spinge l'aria fuori dal tubo in modo che nulla possa ottenerlo. Continua a tenere il coperchio con il mignolo per il passaggio successivo.
Passaggio 7. Inoculare
Tocca l'anello di inoculazione su una colonia che vuoi raccogliere. Se stai inoculando da brodo liquido, immergi l'ansa di inoculazione nel tubo e agita l'ansa per assicurarti di ottenere abbastanza batteri.
Passaggio 8. Chiudere la cultura originale
Se è un piatto, chiudi il coperchio e rimettilo a posto. Se si tratta di un tubo, trascina due volte l'apertura attraverso la fiamma del becco Bunsen, quindi rimetti il coperchio.
Passaggio 9. Aprire la nuova piastra
Come prima, usa la mano libera per aprire il coperchio a manovella quanto basta per far entrare l'anello
Passaggio 10. Piastra i batteri
Passare leggermente l'ansa di inoculazione sulla superficie, facendo attenzione a non penetrare nell'agar.
Un modello di striatura comune è il metodo del quadrante
Passaggio 11. Chiudere la piastra
Passaggio 12. Sterilizzare l'ansa di inoculazione
Come prima, tienilo a un angolo di 45° verso il basso e muovilo lentamente attraverso la fiamma in modo che diventi rosso-bianco.
Suggerimenti
- In generale, i guanti non sono necessari. Tutti i passaggi precedenti servono a proteggere sia te stesso che i tuoi batteri, quindi il rischio di contaminazione è molto basso. I guanti possono provocare brutte ustioni se li tocchi accidentalmente con l'anello di inoculazione caldo.
- Tieni presente che stai lavorando con il fuoco. Non è un grosso problema, assicurati solo di sapere cosa fare se ti scotti; mettere in pausa l'esperimento, sciacquare l'ustione con acqua e, se necessario, informare il proprio supervisore.
- Se stai eseguendo più sessioni in cui devi utilizzare una tecnica asettica, non è necessario spegnere completamente il becco Bunsen tra una corsa e l'altra: basta abbassarlo fino alla fiamma pilota e spegnerlo completamente solo quando hai finito.
